LabQ Taq DNA-Polymerase

REAKTIONS-SETUP

1) Tauen Sie alle Reaktionskomponenten vollständig auf und mischen Sie sie vorsichtig, um eine gleichmäßige Verteilung aller Komponenten sicherzustellen.
Bereiten Sie die Reaktion auf Eis in einem sterilen, nukleasefreien Röhrchen vor und mischen Sie es nach Zugabe der Polymerase vorsichtig.
Sammeln Sie die gesamte Flüssigkeit am Boden des Röhrchens durch schnelles Drehen auf.

KOMPONENTENVOLUMEN ENDKONZENTRATION

10X PCR-Puffer 5 µl 1X
dNTP-Mix (jeweils 10 mM) 0,5 µl je 0,1 mM
Primer 1 (10 µM) 1 µl 0,1 µM – 0,5 µM
Primer 2 (10 µM) 1 µl 0,1 µM – 0,5 µM
LabQ Taq DNA Polymerase (5 U/µL) 0,2 µl 1 U
Template-DNA 1 µl <1 µg
dH2O auf 50 µl

2) Bewahren Sie die Reaktionen auf Eis auf, bis sie in den Thermocycler übertragen werden, und durchlaufen Sie dann den Zyklus gemäß diesen Richtlinien:

SCHRITTZYKLEN TEMPERATURDAUER

Anfängliche Denaturierung 1 94°C 5 Minuten
Verstärkung 30-35 94°C 30 Sekunden
Tm – 5°C 30 Sekunden
72°C 1 Minute/kb
Letzte Verlängerung 1 72°C 5 Minuten
Halten Sie 1 4°C

3) Analysieren Sie die Amplifikationsreaktion durch Gelelektrophorese unter Verwendung eines geeigneten Acrylamid- oder Agarosegels
Prozentsatz.