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LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal

LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal, 2000 Reaktionen
  • Allround-qPCR-Mix für den SYBR®Green-basierten Nachweis
  • Optimiert für ein breites Anwendungsspektrum
  • Reduziert das Risiko einer Kontamination durch PCR-Produkte
  • Geeignet für alle PCR-Geräte
  • 2000 rxn á 20µl (4x5ml)
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LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal

1

Inklusive

  • HotStart-Funktion für maximale Kontrolle über den Reaktionsstart (z. B. bei automatisierten Anwendungen).
  • dUTP/dTTP-Mischung zur Ermöglichung der UNG-Verdauung (Verringerung des Risikos einer Kontamination durch PCR-Produkte).
  • Universelle ROX-Konzentration, geeignet für alle PCR-Geräte.
  • Zusätzliche Normalisierungsoption für Bio-Rad-Cycler.
  • Verbesserte Leistung in Gegenwart eines PCR-Inhibitors.
2

Zusätzliche Materialien erforderlich

  • Nukleasefreie PCR-Gefäße oder -Platten und passende Verschlussmöglichkeiten.
  • Echtzeit-PCR-Cycler.
  • PCR-Primer.
  • Template-DNA und Kontroll-DNA-Standards.
  • Pipettenspitzen filtern.
  • Sterile, nuklease- und DNA-freie Röhrchen zur Vorbereitung des Reaktionsgemisches.

Reaktionsaufbau

Bevor Sie mit dem Reaktionsaufbau beginnen, tauen Sie das LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal auf und mischen Sie es gründlich, aber vorsichtig, um eine gleichmäßige Verteilung der Komponenten sicherzustellen.

Verdünnen Sie Ihre Standard-DNA und experimentellen Proben mit nukleasefreiem Wasser auf die gewünschten Konzentrationen und geben Sie sie in die dafür vorgesehenen Vertiefungen der Multi-Well-Platte.

Für die Negativkontrolle nukleasefreies Wasser hinzufügen.

Bewahren Sie die Platte bis zur weiteren Verwendung auf Eis auf.

Komponente Volumen Endgültige Konzentration
LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal 10 µl 1x
Template-DNA < 10 ng für Vorlagen mit geringer Komplexität
X µl >1 für Vorlagen mit hoher Komplexität
Max. 2 µl Reverse-Transkriptionsreaktion
Vorwärtsprimer (10 µM) 0.4 µl Jeweils 0,05 – 0,09 µM
Reverse-Primer (10µM) 0.4 µl Jeweils 0,05 – 0,9 µM
Nukleasefreies dH2O To 20 µl

Empfohlenes qPCR-Protokoll

Satz Fahrräder °C Zeit
Erste Denaturierung 1 95°C 5 Minuten
Verstärkung 40 95°C

55-60°

72°C

10 Sekunden

15 Sekunden / 10 Sekunden

20 Sekunden

Fügen Sie bei Bedarf einen zusätzlichen Schmelzkurvenschritt hinzu. Um eine spezifische Amplifikation sicherzustellen und mögliche Primer-Oligomere zu erkennen, wird eine Schmelzkurve empfohlen.

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